Protocolo de refrigeración
Otro de los objetivos fue definir un protocolo de refrigeración a 5ºC (conservación a medio plazo) para el semen de morueco en base a medios de dilución basados en LDL o LS. En este caso, se valoró el efecto sobre la calidad seminal del tiempo de mantenimiento (6, 48, 96 y 144 horas) de los espermatozoides en el medio de dilución con LDL, a fin de estimar su efectividad en un protocolo de refrigeración.
La movilidad individual disminuye casi un 50% a las 96 y 144 horas de mantenimiento. Las concentraciones de LDL al 8 y 9% mostraron ser mejores a las 96 y 144 horas por lo que se consideran más adecuadas para la conservación a 5º C. En cuanto a la viabilidad espermática se observaron los mejores resultados para la LDL al 5%. Con el medio de dilución a base de soja S20 se realizó un ensayo a 5º C y en dos tiempos de mantenimiento de la muestra para determinar el efecto del glicerol como un sistema de estabilización de la soja y como adyuvante en el proceso de conservación seminal. No obstante, los resultados demostraron que no existe un efecto significativo del glicerol sobre la calidad in vitro de la muestra seminal.
Otro de los objetivos fue el de una metodología de congelación de semen de morueco en base a lipoproteínas de baja densidad (LDLy) o lecitina de soja (LS). Tomando en consideración los resultados obtenidos, el medio de dilución con 5% o 6% de LDL es el que mejor preserva la calidad de la muestra seminal durante el proceso de congelación-descongelación. Los datos de fertilidad (partos) presentan valores más altos para el medio definido con LDL 8%.
El último objetivo este proyecto fue estudiar la calidad espermática postdescongelación de semen ovino congelado a elevadas concentraciones celulares (de espermatozoides: 200, 400, 800 y 1600 millones por mililitro) con la finalidad de optimizar la aplicación del semen transcervical.
Los resultados obtenidos indican que, en general, el incremento de la concentración espermática en las pajuelas afecta negativamente a la calidad de las muestras descongeladas.
La movilidad espermática y la viabilidad celular no se ven afectadas en las muestras con una concentración entre 200 y 800 millones por militro, pero el uso concentraciones más elevadas aumenta significativamente el número de espermatozoides con daños en la membrana plasmática, lo cual reduce la viabilidad celular y la capacidad fertilizante de la muestra.